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简述纸层析的基本原理。
纸层析是层析法的一种,要了解纸层法还得从层析法开始.层析法又称色层分析法或色谱法(chromatography),是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。例如:我们利用物质在溶解度、吸附能力、立体化学特性及分子的大小、带电情况及离子交换、亲和力的大小及特异的生物学反应等方面的差异,使其在流动相与固定相之间的分配系数(或称分配常数)不同,达到彼此分离的目的。
层析法的最大特点是分离效率高,它能分离各种性质极相类似的物质。而且它既可以用于少量物质的分析鉴定,又可用于大量物质的分离纯化制备。因此,作为一种重要的分析分离手段与方法,它广泛地应用于科学研究与工业生产上。现在,它在石油、化工、医药卫生、生物科学、环境科学、农业科学等领域都发挥着十分重要的作用。
层析根据固定相基质的形式分类,层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。其中纸层析是指以滤纸作为基质的层析。
纸层析的原理是什么,它怎么会分层?
纸层析原理:两种不同溶剂中的分配系数不同。原因是由于纤维素上的亲水羟基使这部分水围绕在纤维素周围,不易扩散而形成固定相。
不同的物质因其在各种溶剂中的溶解度不同,因而也就有不同的分配系数。分配层析中应用最广泛的多孔支持物是滤纸,其次是硅胶、硅藻土、纤维素粉、淀粉和微孔聚乙烯粉等。
理论依据:
在实际操作中,点样后的滤纸一端浸没于流动相液面之下,由于毛细作用,有机相即流动相开始从滤纸的一端向另一端渗透扩展。
当流动相(有机相)沿滤纸经点样处时,样品点上的溶质在水和有机相之间不断进行分配,一部分样品离开原点随流动相移动,进入无溶质区,此时又重新分配,一部分溶质由流动相进入固定相(水相)。
随着流动相的不断移动,因样品中各种不同的溶质组分有不同的分配系数,移动速率也不一样,所以各种不同的部分按其各自的分配系数不断进行分配,并沿着流动相流动的方向移动,从而使样品中各组分得到分离和纯化。
纸层析的概念和原理?
纸层析法(paper
chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相。在层析时,将样品点在距滤纸一端约2~3cm的某一处,该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基酸在两相中不断分配,由于分配系数(kd)不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上。物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值(rate
of
flow,
rf)来表示。所谓rf,是指在纸层析中,从原点至氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(x)与原点至溶剂前沿的距离(y)的比值:
在一定条件下某种物质的rf值是常数。rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。
简述纸层析的基本原理.如题
纸层析:是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维和水有较强的亲和力,能吸收百分之22左右的水,而且其中百分之6到百分之7的水是以氢键形式与纤维素的羟基结合,所以在一般条件下较难脱去。而滤纸纤维与有机溶剂的亲和力很弱,所以一般的纸层析实际上是以滤纸纤维的结合水为固定相,以有机溶剂为流动相
通常会利用此特性达到分离鉴定的目的。例如在提取有关光合作用色素的实验中,就是利用纸层析法,将溶解度不同的色素提取出来。
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